ГОСТ 33036—2014
5 Веществосравнения
Веществосравнения в тестедля определения 1_С50должно выбиратьсяпо собственному усмотре
нию игарантировать, что лабораторныеусловия, в которых проводятопыты, соответствуют требовани
ям и не подвержены существенным временным изменениям. Оптимальным веществом сравнения,
удовлетворяющим этим условиям, является хлорацетамид.
6 Достоверность теста
Тест считается достоверным, если гибель червей в контроле не превышает 10 % к концу испыта
ния.
7 Описаниетеста
7.1 Оборудование и материалы
Обычноелабораторное оборудование испециальные принадлежности:
- культура дождевых червей (см. 7.2);
- фильтровальная бумага среднего качества толщиной примерно 0.2 мм и плотностью от 80 до
85 г/м2;
- искусственный почвенный субстрат, приготовленный следующим образом;
10 % сфагнового сухого и тонко растертого торфа (pH 5.5—6.0; без видимых растительныхостат
ков);
20 % каолиновой глины (с содержанием каолина около 30 %);
70% промышленного песка (предпочтителен мелкий песок с преобладанием частиц размером
от 50до 200 микрон — более 50 %).
pH в искусственном субстрате регулируют в пределах 6.01 0.5 карбонатом кальция [1]. Сухие
составные части тщательно смешивают в строго установленных пропорциях, каждый раз взвешивая
общую массу. Влажностьсмесиопределяютпри высушивании небольшого количестваобразцапри тем
пературе 105 °С. Деионизированную водудобавляют к полученной смесидо влажности примерно 35 %
сухой массы таким образом, чтобы при сжатии субстрата в руке не выделялась вода. Для некоторых
видов торфа приемлемым будет и более высокоесодержание влаги.
Сосуды, используемые в тесте, должны быть стеклянными — вместимостью около 1л и должны
быть покрытыстеклянными крышками или перфорированной пленкой.
Освещение лабораторной комнаты или камеры должно контролироваться в пределах от 400 до
800Люкс, температура — (20 ± 2) ’С.
7.2 Экспериментальныеживотные
Рекомендуемыйвиддождевыхчервейдлятеста — Eiseniafoef/da(Michaeisen). Этотвиднесовсем
типичендля традиционныхтиповпочви обычно обитаетв почвах, богатыхорганическим веществом. Он
чувствителен кхимическим веществам, имеет короткийжизненный цикл — черви выводятся из коконов
за3—4неделии достигаютполовойзрелости за7—8 недель притемпературеокружающейсреды 20 °С.
Вид очень плодовитый, взрослый червь производит от 2 до 5 коконов в неделю, из которых выводятся
другие черви. Коконы можно приобрести или разводить, разделив популяцию на части (см.
приложение А).
Eisenia foetida существует в виде двух рас червей, морфологически сходных между собой [2]. Но
одна раса — Е. foetida foetida имеет типичные поперечные полоски на сегментах, а другая — Е. foetida
andrei не имееттаковых и более красного цвета. В тесте используют Е. foetida foetida. однако возможно
использование идругой расы.
Для опытов берут взрослых червей (ввозрасте отдвух месяцев) и живой массой от 300до 600 мг.
7.3 Выполнение теста
7.3.1 Тест с фильтровальной бумагой
Рекомендуются плоскодонные стеклянные колбы с плоским дном или другие стеклянные сосуды,
высотой 8 см и диаметром 3 см с плоским дном, стенки которых покрывают фильтровальной бумагой,
нарезанной таким образом, чтобы ее края частично перекрывалидругдруга.
Тестируемое вещество известной концентрации растворяют в дистиллированной воде (если рас
творимость вещества не менее 1000 мг/л) или в наиболее подходящем органическом растворителе
2