ГОСТ 32648—2014
М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы ЙС Т А Н Д А Р Т
МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЯ ПО ВОЗДЕЙСТВИЮ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ
НА ОРГАНИЗМ ЧЕЛОВЕКА
Токсикология генетическая: метод оценки сцепленных с полом
рецессивных летальных мутаций у Drosophila melanogaster
OECD guidelines for the testing of chemicals
Genetic Toxicology: Sex-linked Recessive Lethal Test in Drosophila melanogaster
Дата введения — 2015—06—01
1Область применения
Метод оценки сцепленных с полом рецессивных летальных мутаций на Drosophila melanogaster
(СПРЛМ) применяют для выявления как точковых мутаций, так и небольших делеций в половых
клетках насекомых. Это прямой тест выявления мутаций распространяется на 800 локусов X-
хромосомы, что составляет около 80% всех локусов на Х-хромосоме. Х-хромосома представляет
приблизительно 1/5 полного генома дрозофилы [2].
2 Термины и определения
В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:
2.1 летальная мутация (Lethal mutation): Изменение в геноме, проявление которого вызывает
гибель носителя.
2.2 рецессивная мутация (Recessive mutation): Изменение в геноме, которое проявляется в
гомозиготном или гемизиготном состоянии.
2.3 положительные контроли (Reference substances): Вещества, которые используются как
положительные контроли:
- этилметансульфонат:
- N-нитрозодиметиламин.
2.4 сцепленные с полом гены (Sex-linked): Гены находятся на половых (X и V) хромосомах. В
контексте настоящего стандарта термин «сцепленные с полом гены» распространяется на гены,
локализованные на Х-хромосоме.
3 Принцип исследования
Мутации в Х-хромосоме Drosophila melanogaster фенотипически экспрессируются у самцов,
несущих мутантный ген. Когда мутация летальна в гемизиготном состоянии, ее действие проявляется в
отсутствии в потомстве одного из двух классов самцов, которые нормально появляются у
гетерозиготных самок.
Метод СПРЛМ имеет преимущество в том. что проводится со специально маркированными и
перестроенными хромосомами.
4 Описание метода
Методы проведения теста СПРЛМ на Drosophila melanogaster описаны в работах [2] и [3].
Самцов дикого типа обрабатывают исследуемым веществом и скрещивают с определенными
самками. Самок потомства скрещивают с их братьями. В следующей генерации потомства от каждого
индивидуального скрещивания фенотипически подсчитывают самцов дикого типа. Отсутствие этих
самцов указывает на то, что рецессивные сцепленные с полом летальные мутации возникли в
половых клетках Р1 самцов.
4.1 Материалы
4.1.1 Линии
Могут применять самцов хорошо определяемого дикого типа и самок линии Muller-5. Также
возможно применение других соответственно маркированных линий самок с множественными
инверсиями Х-хромосомы.
Издание официальное
1