ГОСТ 32460-2013
диапазона вида D = а*С * Ь,где а и Ь- эмпирические коэффициенты. Коэффициенты аиЬ
определяют по следующим формулам:
±<C~±C№ \±D >
д _ 1-1П i-l_______________ ” - I
(
2
)
K C - r iO 1
* -Z D -« £
c
,(3)
#•1Г»4
где 0 ,- среднее значение оптической плотности для /-го градуировочного раствора;
С, - массовая концентрация определяемого вещества в /-м градуировочном растворе согласно
таблице 1;
п - количество градуировочных растворов.
Коэффициенты а и h и статистические характеристики могут быть определены с помощью
специального или стандартного программного обеспечения. В условиях автоматической обработки
данных с помощью приборного программного обеспечения градуировочная зависимость может быть
определена и другими статистическими и математическими методами.
Градуировочную зависимость признают приемлемой при выполнении условия
Ь -
d
H
■!—-------—‘ ± \0 Q Z B .(4)
D r
где D r - величина оптической плотности, полученная расчетным путем по градуировочной
характеристике, исходя из известного значения массовой концентрации определяемого вещества в /-
м градуировочном растворе С,. мг/дм3; 8 = 8 % .
9 Выполнение измерений
9.1 В две пробирки вместимостью 10 см3 помещают по 5 см3пробы воды, добавляют в каждую
пробирку по 1 см3 ацетатного буферного раствора pH 4.5 и по 0.2 см3 раствора красителя
лейкокристаллического фиолетового. В одну из пробирок добавляют 0,2 см3раствора пероксидазы,
затем дистиллированной водой доводят объемы растворов в пробирках до 10 см\ Через 15 мин
растворы фотометрируют при 591 нм.
Параллельнаяпроба(без фермента)необходимадляопределенияэквивалентной
концентрации окислителей, способных вступать во взаимодействие с красителем в отсутствие
пероксидазы.
9.2 Измеряют значения оптической плотности, как и в случае проведения градуировки, при 591
нм относительно раствора сравнения, состав которого приведен в таблице 1 (раствор N? 0).
Оптическую плотность каждого раствора измеряют три раза, вычисляют среднее арифметическое
значение оптической плотности для каждого из анализируемых растворов (Di и Дг). Результаты трех
измерений оптической плотности признают приемлемыми при выполнении условия (1).
При каждом анализе проводят измерения массовой концентрации по двум (или трем)
параллельно отобранным пробам. При выполнении серии анализов (более 1 0 -2 0 проб) проводят
процедуру рандомизации: очередность анализа проб определяют с помощью ряда случайных чисел
таким образом, чтобы параллельные пробы анализировались в разное время и в разной
поеледовател ьности.
10 Обработка результатов измерений
Из среднего значения оптической плотности раствора, анализируемого на содержание
пероксида водорода (Д,), вычитают значение оптической плотности (Д2) параллельной пробы, в
которую не добавляли пероксидазу.
По градуировочной зависимости для значения 1) = (0,-Д2) находят массовую концентрацию
пероксида водорода в каждой (ниже -/-й) пробе, мкг/дм3, используя формулу:
5