ГОСТ 32460-2013
8.2.3.6 Градуировочные растворы
Градуировочные растворы готовят непосредственно перед каждой серией анализов в пробирках
вместимостью 10 см3 (под серией понимают измерения, выполненные в течение одного рабочего
дня). В пронумерованные пробирки помещают по 5 см3дистиллированной воды (К,), добавляют по
1 см3 ацетатногобуферногораствораpH4.5(Г6,ф),по0.2см3 растворакрасителя
лейкокристаллического фиолетового (Г№) и определенный объем (см. таблицу 1) рабочего раствора
пероксида водорода (раствор II, 1-10моль/дм1). Добавляют по 0,2 см ’ раствора пероксидазы (Гд*^) и
доводят до 10 см3дистиллированной водой (У2). Фотометрируют через 15 мин.
В таблице 1 указаны данные для приготовления градуировочных растворов с заданным
значением массовой концентрации определяемого вещества. Указанные в таблице аликвоты
отбирают соответствующими пипетками по 5.1. Время хранения градуировочных растворов не может
превышать одного дня.
Т а б л и ц а ! - Характеристика градуировочных растворов
N9
Г, см"
Уз.
c m j
f’tr,*. CMJ
г.р . CMJ
Твари,
Уррв
о.
c m
см3
C (H*Oi).
мкмоль.’дм!
C (HjO,).
мкп’дм1
5.0
3.61.0
0.2
0.20,00
0 .0
0.0
5.0
3.41.0
0.2
0.20,2
0.2
6.8
5.0
3.21.0
0,2
0.20.4
0.4
13,6
5.0
3.01.0
0,2
0.20.6
0.6
20.4
5.0
2.810,0
0.2
0.20.8
0.8
27.2
5.0
2.61.0
0.2
0,21,0
1.0
34.0
5.0
2.11.0
0.2
0,21,5
1.5
51.0
5.0
1,61.0
0.2
0.22.0
2.0
68.0
5.0
1.1
1.0
0,2
0.22.5
2.5
85.0
5.0
0,61.0
0.2
0.23.0
3.0
102.0
D
Относительная погрешность приготовления градуировочных растворов не превышает ± 4 % .
8.2.4 Подготовка спектрофотометра (колориметра) к работе
Включают и настраивают спектрофотометр (колориметр) в соответствии с инструкцией по
эксплуатации и описанием, прилагаемым к прибору. Кюветы перед измерением промывают несколько
раз дистиллированной водой.
8.2.5 Проведение градуировки
Приготовленные градуировочные растворы фотометрируют в последовательности 1. 2. 3. 4. 5.
6, 7, 8, 9. измеряя оптическую плотность при591 нм относительно раствора 0. Толщина
поглощающего слоя 1.0 см.
Проводят три параллельных измерения для каждого раствора, заливая в кюветы новые порции
раствора. Вычисляют средние значения оптической плотности каждого раствора как среднее
арифметическое результатов трех измерений.
Результаты параллельных измерений оптической плотности признают приемлемыми при
выполнении для каждого раствора условия
D niax - D min
-1 0 0 £ K
di
(
1
)
где Dmax,и D - наибольшее, наименьшее и среднее значения оптической плотности
раствора соответственно;
Ко - норматив (соответствующий вероятности Р=0.95). %;
KD= 10%.
При невыполнении этого условия необходимо выявить причины низкой сходимости результатов
измерений, устранить их. после чего повторить измерения.
Далее при компьютерной обработке результатов измерений проводят вычисление
коэффициентов линейной регрессии для определения градуировочной зависимости для данного
4