ГОСТ 32292—2013
между рыбами). Поэтому относительно приемлемой альтернативой может быть выполнение
статистического анализа на уровне отдельной рыбы.
Традиционно ставят, по крайней мере, пять тестовых концентраций взятых в геометрической
прогрессии с фактором желательно не превышающим 3.2.
Вообще, когда тесты выполнены с резервуарами повтора, число репликаций резервуаров
контроля и следовательно число рыбы должно удвоиться по сравнению с каждой тестируемой
концентрацией, которые должны иметь равный размер [13]. [14]. [15]. В противоположность, при
отсутствии репликаций количество рыбы в контрольной группе должно быть тем же самым, что и в
каждой тестовой концентрации.
Если ANOVA основана на резервуарах, а не на отдельной рыбе (которая повлечет за собой
необходимость или отдельной маркировки рыбы или использование псевдо специфичного темпа
роста - см. пункт 8.3). существует потребность в достаточном количестве аквариумов репликации,
чтобы позволить определить стандартное отклонение «резервуаров в пределах концентрации». Это
означает, что степени свободы для ошибки в дисперсионном анализе должна быть, по крайней мере. 5
[11]. Если повторяется только контроль, есть опасность получения ошибочных результатов
изменчивости, потому что она будет увеличиваться со средним значением темпа роста. Так как темп
роста, вероятно, уменьшится с увеличением концентрации, это приведет к тенденции переоценки
изменчивости.
8. Процедура
8.1 Выбор и взвешивание подопытной рыбы
Важно минимизировать изменчивость в весе рыбы в начале теста. Подходящие диапазоны
размера для различных видов, рекомендуемых для использования в этом тесте, даны в приложении А.
Для всей партии рыбы, используемой в тесте, диапазон в отдельных весах в начале теста в
идеале должен находиться в пределах ± 10 % веса среднего арифметического и, в любом случае, не
должен превышать 25%. Рекомендуется взвесить предварительный образец рыбы перед тестом,
чтобы оценить средний вес.
Нужно прекратить кормить общую популяцию за 24 часа до начала теста. Рыба должна быть
выбрана наугад. Используя обычное анастезирующее средство (например, водный раствор 100 мг/л
трикаинметансульфонат (MS 222) нейтрализованный добавлением двух частей бикарбоната натрия на
часть MS 222), рыба должна быть взвешена индивидуально для определения живого веса
(грязного сухого) с точностью, данной в приложении А. Рыбы с весами в пределах намеченного
диапазона должны быть отсажены, а затем беспорядочно распределены между тестовыми
аквариумами. Полный живой вес рыбы в каждом тестовом аквариуме должен быть зарегистрирован.
Использование анестезии, также как и перемещение рыбы (включая промакивание салфеткой и
взвешивание), может вызвать стресс и раны у мальков, в особенности для видов небольшого
размера. Поэтому обработка мальков должна быть сделана с предельной осторожностью, чтобы
избежать повреждения и ранения подопытных животных.
Рыб взвешивают снова на 28 день теста (см. 8.6). Однако, если это необходимо, чтобы
повторно рассчитать порцию корма, рыба может быть взвешена на 14 день теста (см. 8.2.3). Также
может использоваться фотографический метод для определения изменения в размере рыбы, с
помощью которого можно рассчитать порцию корма.
8.2 Условия проведения испытания
8.2.1 Продолжительность
Продолжительность испытания более или равна 28 дням.
8.2.2 Уровень загрузки и плотность посадки
Важно, чтобы уровень загрузки и плотность посадки соответствовал используемым
подопытным видам (см. приложение А). Если плотность посадки слишком высока, это вызывает
стресс перенаселенности, что приводит к уменьшению темпа роста и возможно к болезни. Если
загрузка слишком низкая, это может вызвать территориальное поведение, которое также может
затронуть рост. В любом случае, уровень загрузки должен быть достаточно низким, чтобы
концентрация растворенного кислорода составляла, по крайней мере. 60 % от насыщения и могла бы
быть поддержана без аэрации. Межлабораторный тест [2] показал, что для радужной форели уровень
загрузки 16 особой от 3 до 5 г в 40 - литровом объеме является приемлемым. Рекомендуемая частота
обновления воды во время теста составляет 6 литроа/r рыб/день.
5