ГОСТ 32292—2013
После 48 - часового периода после запуска рыбы регистрируют смертность, используя
следующие критерии:
- смертность более чем 10 % популяции через семь дней: бракуют всю партию:
- смертность между
5
% и 10 % популяции: дополнительная акклиматизация в течение семи
дней; если смертность больше
5
% в течение вторых семи дней, бракуют всю партию:
- смертность менее
5
% популяции через семь дней: принимают всю партию.
Рыбы не должны получать лечение от болезней в две недели, предшествующие тесту и во
время теста.
7. Дизайн теста
Дизайн (план) теста касается выбора числа и интервала экспериментальных концентраций,
числа резервуаров для каждой концентрации и числа рыб на резервуар. В идеале, дизайн теста
должен быть применен по отношению к:
- цели исследования:
- методам статистического анализа, которые будует использоваться;
- доступность и стоимость экспериментальных ресурсов.
Заявленныецели,повозможности,должныопределитьстатистическиеметоды,
чувствительные к определяемым критериям, которые предполагается обнаружить (например, темпу
роста) или. альтернативно, обеспечивающие точность, с которой ЕСх (например, сх = 10. 20. или 30, и
предпочтительно не меньше чем 10) должна быть оценена. Без этого не могут быть даны точные
предписания объема исследования.
Важно признать, что дизайн, который оптимален (лучше всего использует ресурсы) для
использования с одним методом статистического анализа не обязательно оптимален для другого.
Рекомендуемый дизайн для оценки LOEC/NOEC. поэтому не может быть таким же. как это
рекомендовано для регрессионного анализа.
В большинстве случаев регрессионный анализ предпочтительнейдисперсионного по
причинам, обсужденным Stephan and Rogers (9). Однако, если не найдено никакой подходящей
модели регресса (г2< 0.9). должен использоваться NOEC/LOEC.
7.2 Дизайн для регрессионного анализа
Важные соображения в дизайне теста, который будет проанализирован регрессией:
-эффективная концентрация(например. ЕС10.2о.эо). и уровнитестируемого вещества
концентраций, которые вызывают представляющий интерес эффект, должны обязательно быть
представлены концентрациями, включенными в тест. Точность, с которой могут быть сделаны оценки
эффективной концентраций, будет лучше, когда эта концентрация будет находиться в середине
диапазона проверенных концентраций. Предварительный тест по установлению подходящего
диапазона может быть полезен при отборе соответствующих тестовых концентраций:
-чтобы провести удовлетворительное статистическое моделирование, тест должен включать,
по крайней мере, один резервуар контроля и пять дополнительных резервуаров с различными
концентрациями. Если используется агент, повышающий растворимость, дополнительно ставится
один контроль, содержащий этот агента с самой высокой используемой концентрацией (см. пункты
8.3-8.4).
-следует использовать соответствующий геометрический или логарифмический ряд (10) (см.
приложение В). Логарифмический интервал тестовых концентраций предпочтительней:
-еслидоступнобольшешестирезервуаров,дополнительныерезервуарыдолжны
использоваться для репликаций или расширению диапазона концентраций, чтобы сузить уровни
интервалов. Любая из этих мер одинаково желательна.
7.3 Дизайн для оцонки NOEC/LOEC с использованием дисперсионного анализа (ANOVA)
Желательно должны быть дублирующие резервуары длякаждой концентрации,и
статистический анализ должен проводиться на уровне резервуара (11). Без репликации аквариумов не
может быть проведено никакого сравнения изменчивости между резервуарами и сравнение будет
проводиться на уровне отдельной рыбы. Однако, практика показывает (12). что изменчивость между
аквариумами обычно очень мала по сравнению с изменчивостью в пределах резервуара (то есть 4