ГОСТ 32307-2013
В настоящем стандарте используется жидкостной хроматограф Dionex Ultimate 3000 с колон
кой Supelco SUPELCOSIL LC-PAH 5 мкм 4.6 * 150 мм. Данная информация является рекомендуемой,
приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не исключает возможность исполь
зования других средств измерений с аналогичными свойствами.
Температура колонки 30 °С. Детектирование проводят при следующих длинах волн:
325 нм - для витамина А:
270 нм - для витаминов 0
2
и D3;
285 нм - для витамина Е.
7.2 Идентификацию пиков хроматограммы исследуемого раствора проводят сравнением с
хроматограммой градуировочного раствора по двум параметрам: времени удерживания и спектраль
ному отношению R (отношение высот хроматографического пика на разных длинах волн).
7.3 Если время удерживания и спектральные отношения пиков хроматограммы исследуемого
раствора совпадают в пределах допускаемых отклонений(ДR 5 0,05. ДtR S 3 %) с временем
удерживания и спектральными отношениями соответствующих им пиков хроматограммы градуиро
вочного раствора, результат идентификации считают положительным.
7.4 Если спектральные отношения совпадают в пределах допускаемого отклонения, а разница
времени удерживания пиков хроматограммы исследуемого раствора и хроматограммы градуировоч
ного раствора больше допускаемого отклонения, проводят хроматографический анализ соответст
вующего градуировочного раствора по 7.1 и сравнивают время удерживания. В случае совпадения в
дальнейшем в качестве образца используют новую хроматограмму.
В случае повторного несовпадения времени удерживания используют метод добавок, для че
го к исследуемому раствору добавляют известные количества определяемых витаминов с концен
трацией. сравнимой с концентрацией «сомнительных» пиков, и анализируют по 7.1.
Если на хроматограмме пробы с добавкой площади «сомнительных» пиков увеличились на
величину, соответствующую величине добавки, эти пики относятся к определяемым компонентам.
Если на хроматограмме пробы с добавкой наряду с «сомнительными» пиками присутствуют
пики, время удерживания и спектральные отношения которых совпадают с соответствующими пара
метрами добавленных компонентов, сомнительные пики не относятся к определяемым компонентам.
7.5 Если время удерживания соответствующих пиков хроматограммы исследуемого раствора
и хроматограммы градуировочного раствора совпадают в пределах допускаемого отклонения, а раз
ница спектральных отношений больше допускаемого отклонения, настоящая методика неприменима
к данному образцу.
7.6 Массовая концентрация витаминов в исследуемом растворе не должна превышать пре
дельных значений концентраций градуировочных растворов. В случае превышения исследуемый рас
твор. содержащий витамины, с помощью механического дозатора разбавляют метанолом в рассчи
танное количество раз и проводят хроматографический анализ разбавленных растворов. Если мас
совая концентрация витаминов в исследуемом растворе ниже предельного значения градуировочного
раствора, необходимо увеличить массу пробы.
8 Обработка результатов
8.1 Массовую долю каждого витамина в продукте X. мг/кг. вычисляют по формуле
Сс, S,- Vp
Х= -----------------------------(1)
Sc, •т ■1000
где Сет - массовая концентрация индивидуального витамина в градуировочном растворе,
мг/см3:
S ,- площадь пика индивидуального витамина в анализируемой пробе, усл.ед.;
SCI- площадь пика индивидуального витамина в градуировочном растворе, усл.ед.:
Vp- объем растворителя, взятый для растворения сухого остатка после упаривания, см3;
т - масса исследуемой пробы, г.
1000
- коэффициент перевода массы г в кг анализируемой пробы.
За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение двух параллельных
измерений, округленное до второго десятичного знака.
5