ГОСТ 32307-2013
приготовления градуировочного раствора 3 в мерную колбу вместимостью 100 см
3
по ГОСТ 1770 пе
реносят
10
см
3
градуировочного раствора
2
идоводят объем до метки метанолом.
Для определения витамина Е из основного раствора массовой концентрации 1.0 мг/см
3
гото
вят градуировочные растворы массовой концентрации 0.1 мг/см
3
(раствор 1). 0,05 мг/см
3
(раствор 2) и
0.005 мг/см
3
(раствор 3).
Для этого градуированной пипеткой в мерные колбы вместимостью 100 см
3
по ГОСТ 1770 пе
реносят соответственно 10 см’ основного раствора витамина (для раствора 1) и 5 см
3
основного рас
твора витамина (для раствора 2). Объем раствора доводят до метки метанолом. Для приготовления
градуировочного раствора 3 в мерную колбу вместимостью 100 см
3
по ГОСТ 1770 переносят 10 см
3
градуировочного раствора
2
и доводят до метки метанолом.
Допускается использование смеси градуировочных растворов витаминов. Допускается приго
товление градуировочных растворов с другими номинальными концентрациями целевых веществ в
пределах измеряемого диапазона.
6.1
.6
Растворы хранят в холодильнике при температуре (4
±
2) °С в течение7 сут.
6.2 Приготовление раствора гидроокиси калия молярной концентрации с(КОН) = 10,0
моль/дм3
Взвешивают 56.0 г гидроокиси калия, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см
3
по ГОСТ
1770. растворяют вдистиллированной воде по ГОСТ 6709 идоводят объем до метки.
Раствор помещают в стеклянную колбу с притертой пробкой и хранят при комнатной темпера
туре в темном месте не более одного месяца.
6.3 Подготовка пробы
6.3.1 Щелочной гидролиз пробы
Пробу анализируемого продукта массой (5.00
±
0,01) г. помещают в круглодонную колбу со
шлифом вместимостью 250 см
3
по ГОСТ 25336. Последовательно добавляют 50 см
3
этилового спирта
по ГОСТ 18300.10 см
3
раствора гидроокиси калия и 50 мг агидола.
Колбу соединяют с обратным холодильником, помешают в водяную баню и нагревают при
температуре (80
±
2) °С в течение 30 мин. периодически перемешивая палочкой из боросиликатного
стекла по ГОСТ 27460 содержимое колбы. После этого содержимое колбы охлаждают до комнатной
температуры.
6.3.2 Экстракция жирорастворимых витаминов
В колбу приливают 50 см
3
дистиллированной воды и 50 см
3
диэтилового эфира, перемешива
ют. сливают в делительную воронку вместимостью 500 см
3
по ГОСТ 25336 и дают отстояться. После
расслаивания нижний водно-спиртовой слой сливают в коническую колбу вместимостью 250 см
3
по
ГОСТ 25336. а верхний эфирный слой оставляют в делительной воронке. Переливают водно-
спиртовой слой в другую делительную воронку, добавляют 50 см
3
диэтилового эфира, встряхивают,
отстаивают и после расслаивания верхний эфирный слой присоединяют к эфирному экстракту в пер
вой делительной воронке.
Эфирный экстракт промывают дистиллированной водой порциями по 50 см3, отбрасывая ниж
ний водный слой, повторяя данную процедуру трижды.
Промытый эфирный экстракт фильтруют в круглодонную колбу вместимостью 250 см
3
через
складчатый фильтр со слоем безводного сернокислого натрия (10-15 г), помещенный в коническую
воронку. Эфир отгоняют на роторном испарителе при температуре не выше 30 °С под вакуумом.
Сухой остаток растворяют в 0.5 см
3
метанола, переносят в виалу из темного стекла вмести
мостью 1.5 см
3
и проводят хроматографический анализ в соответствии с разделом 7.
П р и м е ч а н и е - Из-за высокой чувствительности витаминов к ультрафиолетовому свету
и воздуху все процедуры, связанные с анализом, следует завершить в течение одного рабочего дня.
избегая воздействия натурального и интенсивного флуоресцентного света.
7 Проведение измерений
3
7.1Условия проведения хроматографического анализа подбираются в зависимости от вида
применяемого жидкостного хроматографа и хроматографической колонки.
В качестве примера могут быть приведены следующие условия хроматографического опреде
ления жирорастворимых витаминов, выполненные на жидкостном хроматографе’.
0.02
см
3
исследуемого раствора вводят в подготовленный к работе жидкостный хроматограф.
Элюирование проводят в изократических условиях в течение12 мин.
Состав элюента: смесь метанола и воды в объемном соотношении 92:8. Скорость подачи
элюента
2,0
см /мин.
4