ГОСТ Р ИСО 8573-7—2005
Приложение В
(рекомендуемое)
Количественный метод отбора проб
l
В.1 Отбор проб с использованием щелевого пробоотборника
В.1.1 Принцип отбора проб
Механизм захвата микроорганизмов с использованием щелевого пробоотборника (импакгора для анализа
воздуха) характеризуется простотой и надежностью. Воздух из установки сжатого воздуха проходит через специ
ально сконструированный переходник и ускоряется при поступлении через узкую щель к влажной поверхности
агаровой питательной среды (рисунок 1). Согласно закону инерции микроорганизмы (как более тяжелые) оседают
на поверхность среды, а молекулы воздуха отклоняются от нее. При соответствующих условиях инкубации микро
организмы вырастают в колонии, которые подсчитываются в предположении, что один микроорганизм вырастает в
одну колонию.
Щелевой пробоотборник используется для бактерий, дрожжей или грибов: для вирусов и бактериофагов
применяются специальные методы отбора проб. Поскольку оседание частиц происходит на большую поверхность
агаровой питательной среды в чашке Петри диаметром 140 мм и пробоотборник расположен радиально относи
тельно вращающейся чашки, то может быть подсчитано большее число микроорганизмов.
В.1.2 Методы работы в асептических условиях
Метод отбора проб предусматривает работу в асептических условиях. В качестве дезинфицирующего сред
ства рекомендуется использование 70 % -ного этилового спирта. Во время простоя пробоотборника следует прини
мать меры, ограничивающие рост микроорганизмов. Все операции, связанные с открытием щели, должны
проводиться в минимальные сроки, чтобы избежать возможности попадания загрязнений из непосредственного
окружения. Должны приниматься меры, исключающие сквозняки.
В.2 Методика отбора проб
Для отбора проб следует применять следующую методику:
a) оборудование, используемое для отбора проб, в т. ч. трубки и шланги, непосредственно перед использо
ванием стерилизуется дезинфицирующим средством;
b
) испытуемая проба воздуха пропускается через пробоотборник и соединенные с ним трубки и шланги (без
чашки Петри с агаровой питательной средой). Это необходимо для испарения дезинфицирующего средства и
настройки щелевого пробоотборника;
c) путем выполнения процедур по перечислениям d) — f) (при выключенном пробоотборнике) до и после
контроля проводится «слепое испытание». Используемые при этом чашки Петри диаметром 140 мм. наполненные
агаровой питательной средой, не должны показывать роста микроорганизмов;
d) на дне чашки Петри снаружи закрепляется этикетка с информацией о дате и начале испытания, адресе
места проведения испытания, коде и т. д. Отмечается начальная позиция и направление вращения;
e) проверяется, что индикатор уровня и крышка в щелевом пробоотборнике для входа воздуха открыты. При
открытой крышке проверяется правильность расположения держателя пластины и микропереключателя. Внутрен
ние поверхности пробоотборника протираются дезинфицирующим средством:
f) чашка Петри вставляется в щелевой пробоотборник таким образом, чтобы ее радиус располагался верти
кально под щелью для поступления воздуха. Крышка чашки Петри снимается и помещается в стерильный пласти
ковый пакет;
д) после снятия крышки чашки Петри крышка щелевого пробоотборника возвращается в исходное положение;
h) освобождается индикатор уровня и осторожно опускается к поверхности агаровой питательной среды.
Крышка щелевого пробоотборника для входа воздуха опускается так. чтобы индикаторная стрелка указывала на
нижний край направляющего желоба. Индикатор уровня пробоотборника возвращается в верхнюю позицию и
закрепляется;
i) после нажатия клавиши «старт» начинается автоматический отбор пробы. Отмечается время начала и
продолжительность отбора пробы, наименование и размещение испытательного оборудования и другие условия
или явления, которые могуг повлиять на результаты контроля;
j) отбор пробы завершается при выключении индикаторной лампы. При выключенной клавише «старт/стоп»
поднимается крышка для входа воздуха:
k) крышка щелевого пробоотборника освобождается и осторожно сдвигается с одновременным извлечением
крышки чашки Петри из стерильного пластикового пакета для последующего закрытия чашки Петри. Такиедействия
проводятся осторожно, чтобы не повредить агаровую питательную среду с пробой сжатого воздуха:
) чашка Петри извлекается из пробоотборника, закрывается крышкой, заклеивается лентой и помещается в
стерильный пакет, который также заклеивается;
т ) чашки Петри инкубируются при комнатной температуре и через соответствующий период времени осмат-
5