ГОСТ Р ИСО 8573-7—2005
риваются (В.З). В центре и на внешнем краеповерхности агаровой питательной среды копониеобразующие единицы
должны отсутствовать.
П р и м е ч а н и е — Линия «старт/финиш» может содержать «дополнительные» колонии;
п) ручка активации держателя чашки передвигается и микропереключатель переводится в другую стартовую
позицию;
о) внутренние поверхности щелевого пробоотборника протираются дезинфицирующим средством и закрыва
ются крышкой;
р) для следующего отбора пробы приведенные действия повторяются.
Следует контролировать условия транспортирования чашек Петри от производителя, наполнившего их ага
ровой питательной средой, до места отбора пробы в лаборатории на предмет возможного загрязнения чашек при
транспортировании. Чашки Петри после транспортирования не должны показывать роста микроорганизмов.
В.З Инкубация загрязняющих жизнеспособных микроорганизмов
Наиболее подходящей температурой инкубации микроорганизмов в общем случае является температура
окружающей среды, в которой они находились до отбора проб. Мезофильные бактерии или грибы культивируются
при температуре от 20 "С до 30 ’С. Для некоторых термочувствительных бактерий могут потребоваться другие
температуры инкубации. Период инкубации обычно составляет для грибов 14 сут, для меэофильных бактерий — от 2 до 14
сут. Возможны идругие температуры инкубации микроорганизмов.
Для выделения отдельных видов бактерий (например грамм-отрицательных энтеробактерий) могут исполь
зоваться селективные среды (агаровые питательные). Число колониеобразующих единиц подсчитывается через
заданный период времени (например 24 ч).
В.4 Подсчет колониеобразующих единиц (КОЕ)
Неселективные среды анализируются на наличие роста колониеобразующих единиц, начиная с 24 ч после
начала инкубации, с повторным подсчетом колоний каждые 24 ч в течение 14 сут. Для предотвращения неопреде
ленности измерений при инкубации следует проводить регулярные наблюдения и подсчет колоний по мере их
выявления и с учетом возможности перерастания.
Приложение С
(справочное)
Отбор проб на эндотоксины
С.1 Общие положения
Отбор проб сжатого воздуха на эндотоксины является сложным процессом, требующим неиспользованных
ранее пластиковых трубок и стеклянных флаконов, а также персонала, обученного методам отбора проб. Наличие
эндотоксинов в сжатом воздухе подтверждается после подсчета количества грамм-отрицательных энтеробактерий в
конденсате сжатого воздуха и дополнительных измерений содержания бактерий, грибов и дрожжей.
С.2 Методика отбора проб
П р и м е ч а н и е — Содержание в сжатом воздухе всего нескольких нанограмм эндотоксинов (продуктов
метаболизма грамм-отрицательных бактерий) может вызвать заболевание.
Испытания следует проводить в стерильных условиях с применением пластины с соответствующей агаровой
средой. Точки отбора проб в системе сжатого воздуха выбираются в местах, удобных для сбора конденсата. Для
подсчета количества грамм-отрицательных бактерий в конденсате используется следующая методика;
a) непосредственно перед испытанием точки отбора пробы дезинфицируются 70 %-ным этиловым спиртом;
b
) с флакона с агаровой питательной средой снимается крышка с прикрепленной к ней пластиной;
c) из точки отбора пробы конденсат отбирается в стерильный флакон;
d) прикрепленная к крышке флакона пластина вводится в отобранный конденсат на 10 с. Обе поверхности
(пластины и конденсата) должны контактировать;
в) пластина медленно (примерно за 3 с) извлекается из конденсата;
0 содержимое флакона выливается;
д) после инокуляции пластина вновь помещается во флакон. На этой стадии флакон с пластиной может
храниться или транспортироваться в течение нескольких часов, что не влияет на результат. Флакон с испытуемой
пластиной не допускается замораживать;
h) пластины инкубируются при 27 "С в течение 14 сут. При медленном росте микроорганизмов период
инкубации продлевается до 1 мес;
6