ГОСТ 31486—2012
до комнатнойтемпературы, приливают в каждую колбу по 7.5см3смесиэтиловогоспирта по 6.1 иводно
гоаммиакас массовойдолей 25 %в объемном соотношении 1:1. перемешивают, доводятобъемы в кол
бахдо метки этиловым спиртом, тщательноперемешиваютиизмеряютоптическиеплотности растворов
сравнения в порядке возрастания их концентраций на спектрофотометре при длине волны 635 нм или
фотоэлектроколориметре с красным светофильтром при длине волны (625 ±25) нм в юовете толщиной
поглощающего свет слоя 10 мм относительно контрольного раствора.
По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси ординат значения
оптической плотности растворов сравнения, на оси абсцисс — содержание витамина Kj, мкг/25 см3
раствора.
6.2.5 Приготовление контрольного раствора
5 см31.2-Дихлорэтана отбираютв мернуюколбу вместимостью25см3,приливают 7.5см3раствора
(2.4-Динитрофенил)-гидразина. Колбупомещают вводянуюбанюодновременносиспытуемымипроба
ми и растворами сравнения, далее проводят туже самую обработку, что и с испытуемой пробой по6.3.2
и 6.3.3.
6.3 Проведение анализа
6.3.1 Навеску премикса массойот5 до 10г.взвешенную спогрешностью неболее *0,01 г. помеща
ют в колбувместимостью 250 см3, приливают 100 см3этилового спирта с массовойдолей40 %. встряхи
вают на аппарате в течение 15 мин и центрифугируют в течение 10 мин при 3000 об/мин. Центрифугат
фильтруютдля устраненияслучайно оставшихся взвешенныхчастиц. Отбираютот5 до 25 см3фильтра
та в зависимостиотпредполагаемогосодержания витамина К3в испытуемом образце премикса, в дели
тельную воронку вместимостью 250 см3 приливают 50 см3 1.2-Дихлорэтана и 20 см3
раствора углекислого натрия с массовойдолей 10 % и перемешиваютв течение 0.5—1.0 мин.
Раствор отстаиваютдоразделенияфаз. Затемфазу, содержащую 1.2-Дихлорэтана, вполном объ
еме переносят вдругую делительную воронку, приливают в нее 20 см3дистиллированной воды и пере
мешивают в течение 0,5 мин.
После этогорастворусновадаютотстоятьсядофазоразделения и фазу, содержащую 1,2-Дихлор
этана. фильтруют через бумажный беззольный фильтр.
6.3.2 5 см3 1,2-Дихлорэтанового экстракта испытуемых проб отбирают в мерную колбу вмести
мостью 25см3,приливают7.5см3раствора(2.4-Динитрофенил)-гидразина (см. 6.2.1). колбу помещают в
водяную баню ивыдерживаютее 2 ч при температуре (70 • 2) °С. периодически перемешивая содержи
мое колбы.
6.3.3 По истечении указанного времени содержимое колбы охлаждаютдо комнатной температу
ры, приливают 7,5см3смеси этиловогоспирта по6.1 и водного аммиака с массовойдолей 25 %в объем
ном соотношении 1:1.доводят объем в колбе этиловым спиртом до метки, тщательно перемешивают и
измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 635 нм
или фотоэлектроколориметрес красным светофильтром при длине волны (625 i 25) нм в кювететолщи
ной поглощающего свет слоя 10 мм относительно контрольного раствора (см. 6.2.5). Раствор готовят в
день проведенияанализа.
7 Обработка результатов анализа
7.1 Содержание витамина К3в премиксе X, г/т. вычисляют поформуле
cvv.j ■10а
mv,vs-10e’
(
1
)
где с — масса витамина К3. найденная по градуировочному графику, мкг;
v — объем спиртовогоэкстракта, см3;
v2— объем 1.2-Дихлорэтана, взятыйдля экстракции, см3;
106— коэффициент перевода микрограммов в граммы;
т — масса навески премикса, г,
и, — объем фильтрата спиртового экстракта, взятыйдля экстрагирования 1.2-Дихлорэтаном, см3;
v3— объем 1.2-Дихлорэтановогоэкстракта, взятыйдля окрашивания, см3;
105 — коэффициент перевода граммов втонны.
7.2Вычисления выполняютс точностью до второгодесятичного знакас последующим округлени
ем до первогодесятичного знака.
4