Стр. 6 ГОСТ 2S723— #2
среду поддерживающую:0,5%лактальбумина на растворе
Эрла с 3%-ной сывороткой крупного рогатого скота;
раствор фосфатно-буферный.
3.3. Подгот овкакисследованию
3.3.1. Из взятых проб (корочек) готовят 10%-ную суспензию
в фосфатло-буферном растворе, содержащем 500 ЕД пеницилли
на, 250 мкг стрептомицина и 50 ЕД нистатина на 1 см3.
Полученнуюсуспензию центрифугируют в течение 30 мин с
частотой вращения 2000—3000 об/мин. Для проведении исследо
вания берут надосадочную жидкость.
3.4. Проведениеи с следован ия
3.4.1. Порцияминадосадочной жидкости по 0,2 см3 из каж
дой пробы инфицируют по 4—5 пробирок с культуройклеток,
полученной из почек, семенников или щитовидной железыяг
нят. Адсорбция длится 60 мнн при температуре 37°С, жидкость
удаляется и заменяется поддерживающей средой.
3.4.2. Проводят инкубацию культуры тканей в термостате
при температуре 37 °С. В культуре ткани, в отличие от конт
рольных незаряженных проб, вирус вызываетцнтопаткческнй
эффект в период между 4 и 14 сут.
Вирус сначала размножается только в клетках тканей яг нят,
но после его изоляции может размножаться и в тканевых
культурах почек н семенников телят.
3.4.3. Идентификацию вируса проводят методомвируснейт-
рализации с применением специфической сыворотки.Реакцию
нейтралнзацип ставят в культуре клеток путем заражения их
смесямииспытуемого вируса,взятого вдозе 100 ТЦД* с
двукратными разведениями специфической сыворотки по мето
ду, утвержденному в установленном порядке.
3.5. Об р аб о т к аре з ульт ат ов
3.5.1. Вирус контагиозного пустулезного дерматитасчитают
идентифицированным, если оннейтрализуетсяспецифической
сывороткой в разведении, равном ее титру.
4. МЕТОД ПОСТАНОВКИ СИОПРОБЫ
Сущность метода заключается в воспроизведениизаболева
ния у здоровых ягнят, козлят в возрасте 3—6 мес или котят.
4.1. Метод о т б о р апроб
4.1.1. Отбор проб — по п. 3.1.
4.2. П о д г о т о в к ак исследованию
4.2.1. Суспензию дляпроведенияисследованияготовятв
соответствии с п. 3.3.
4.3. Проведен ие и с с л е д о в а н и я