Op. 6 ГОСТ 1644ft
—п
колбыстеклянныевместимостью 50,100 млпоГОСТ
1770-74;
бусы стеклянные или металлические;
воронки стеклянные;
иглы для взятия крови;
пипетки мерные вместимостью1, 2. 5 и 10 мл по ГОСТ
20292-74;
физиологический раствор хлористого натрия pH 6,8—7,2;
марлю.
3.6.2. Подготовка к испытанию
З.6.2.1. Приготовление 2,5%-пой взвеси эритроцитов барана.
Кровь у барана берут утром, до кормления, из яремной вены,
во флакон со стеклянными или металлическими бусами или без
них. Встряхивают 7—10 мин, затем фильтруют через марлю, эри
троциты 3—5 раз отмывают физиологическим раствором путем
центрифугирования при 2500 об/мин до полного обесцвечивания
промывной жидкости. Из осадка эритроцитов готовят 2,5%-ную
взвесь на физиологическом растворе.
3.6.3. Проведение испытания
Комплемент в разведении 1:20 на физиологическом растворе
разливают в ряд пробирок дозами, начиная с 0.1 до 0.4 мл, увели
чивая дозу в каждой следующей пробирке на 0.03 мл (0,10; 0,13;
0,16 мл и т. д. табл. 2). Затем в пробирки доливают физиологиче
ский раствор до 0,5 мл общего объемажидкости (0,40; 0,37;
0,34 мл и т. д.). После этого в каждую пробирку вносят по 1 мл
физиологического раствора, по 0,5 мл 2,5%-ной взвеси эритроци
тов барана и по 0,5 мл гемолизина в удвоенном титре. Одновре
менно в штатив устанавливают три пробирки для контроля. В
первую пробирку контроля вносят 0.4 мл комплемента в разведе нии
1:20, 0,5 мл 2,5%-ной взвеси эритроцитов барана и 1,6 мл
физиологического раствора; во вторую пробирку вносят 0.5 мл
2,5%-ной взвеси эритроцитов барана, 0,5 мл гемолизина в удвоен
ном титре и 1,5 мл физиологического раствора; в третью пробир
ку— 0,5 мл 2,5%-ной взвеси эритроцитов барана и 2,0 мл физио
логического раствора (табл. 2). Перваяпробирка служит для
контроля безвредности комплемента без гемолизина, вторая —для
контроля гемолизина и третья — устанавливает наличие резистент
ности эритроцитов барана.
Штатив с пробирками встряхивают и помещают в водяную
баню при 37—38°С на 10 мни.
3.6.4. Обработка результатов
Штатив с пробирками извлекают из бани и проводят учет
реакций в проходящем свете. Комплемент считают активным при
титре не ниже 0,31 и безвредным при отсутствии гемолиза эритро
цитов в первой пробирке контроля.