ГОСТ 34857—2022
8.2 Построение градуировочных зависимостей
8.2.1 Условия хроматографирования
Полученные градуировочные растворы анализируют на жидкостном хроматографе, начиная с са
мой низкой концентрации. Каждый градуировочный раствор испытывают дважды при следующих усло
виях хроматографирования:
а) для агидола-2:
1)состав подвижной фазы — элюент А (ацетонитрил)/элюент В (деионизированная вода), гради
ентный режим элюирования по программе, приведенной в таблице 2.
Таблица 2 — Программа градиентного режима элюирования
Состав подвижной фазы
Скорость элюирования,
см3/мин
Время, мин
Элюент А (ацетонитрил), %
Элюент В(деионизированная
вода), %
0,070300,8
10,090100,8
16,570300,8
При необходимости подвижную фазу дегазируют,
2) объем вводимого образца — 20 мкл,
3) температура колонки — (25 ± 5) °С,
4) длина волны — 280 нм,
5) ширина щели — 4 нм,
6) время анализа — 16,5 мин,
7) время выхода агидола-2 — (12,4 ± 0,3) мин;
б) для цимата:
1) состав подвижной фазы — ацетонитрил/деионизированная вода в соотношении 80:20, изокра-
тический режим, при необходимости подвижную фазу дегазируют,
2) скорость подачи подвижной фазы — 0,6 см3/мин,
3) объем вводимого образца — 20 мкл,
4 температура колонки — (25 ± 5) °С,
5) длина волны — 254 нм,
6) ширина щели — 4 нм,
7) время анализа — 9 мин,
8) время выхода цимата — (4,4 ± 0,3) мин.
8.2.2 Установление градуировочных характеристик
При построении градуировочной зависимости на оси абсцисс откладывают концентрацию веще
ства в растворе, по оси ординат — соответствующее среднее значение площади пиков, полученных при
параллельных измерениях.
По полученным данным методом наименьших квадратов рассчитывают коэффициенты регрессии
а и Ь градуировочной зависимости, определяемой формулой
у = b ■х + а,
(1)
где Ь и а — коэффициенты регрессии градуировочной зависимости;
х
— концентрация агидола-2 или цимата в градуировочном растворе.
8.3 Контроль стабильности градуировочной зависимости
Контроль градуировочной зависимости осуществляют каждый раз перед началом испытаний.
Градуировочную зависимость считают пригодной, если при испытании контрольного раствора
с заданной концентрацией относительное расхождение между значением концентрации, найденным по
градуировочной зависимости, и значением концентрации, приписанным контрольному раствору, не
превысит норматива стабильности
К,
значения которого приведены в таблице 3:
Щ
1-0*1.100 % < К,(2)
4