С. 3 ГОСТ 13496.22-90
4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ
Навеску воздушно-сухого корма массой (100,040,1) мг помещают в чашку устройства для вы
паривания гидролизатов УВГ-1 (или фарфоровую чашку при выпаривании на водяной бане), при
ливают 5 см-1свежеприготовленной окислительной смеси и выпаривают при постоянном помеши
вании при температуре 60 *С. Сухой остаток количественно переносят в ампулу термоблока ТМ-1
или в пробирку с перетяжкой, используя 10 см1раствора соляной кислоты концентрации с (НС1) = =
6 моль/дм3. Ампулу термоблока герметично закрывают тефлоновой крышкой и устанавливают в
термоблок для гидролизата при температуре 110 С. На блоке управления включают тумблер •Пере
мешивание* и устанавливают время гидролиза 4 ч.
При гидролизе втермостате ампулу запаивают в пламени газовой горелки в месте перетяжки и
помещают в предварительно нагретый до температуры 110 *С сушильный шкаф на 16 ч.
При гидролизе в автоклаве содержимое количественно переносят в пробирки вместимостью
20 см1, закрывают стеклянными колпачками или воронками для предотвращения разбрызгивания
кислоты во время гидролиза и устанавливают вавтоклав. Гидролиз проводят при температуре 137 ’С и
давлении 0,25 МПа в течение 3 ч.
После завершения гидролиза гидролизаты охлаждают до комнатной температуры, перемеши
вают и содержимое фильтруют через беззольный фильтр (первую порцию фильтрата для анализа не
используют). 1—2 см3 фильтрата выпаривают досуха на УВГ-1 или водяной бане и осадок растворя
ют в 10 см3 буферного раствора 2,20 сд. pH. Раствор гидролизата хранят в течение месяца в холо
дильнике в герметично закрытых пробирках.
Испытуемый гидролизат пробы вводят автоматически или при помощи шприца в верхнюю
часть колонки анализатора аминокислот. Для идентификации аминокислот и их количественного
определения на колонку наносят стандартный раствор аминокислот. Порядок работы на аминоана-
ли заторах регламентируется прилагаемой инструкцией.
5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
Содержание аминокислот рассчитывают по соотношению площадей пиков на хроматограмме
соответствующих кислот в стандартном растворе и гидролизатах испытуемых проб.
5.1. Массу аминокислоты (А) в граммах на 1 кг воздушно-сухого вещества корма вычисляют
по формуле
X = c SI V -1000
S2т
где с —концентрация стандартного рабочего раствора, мг/см3;
5| —интегрируемая величина площади пика аминокислоты испытуемой пробы:
V— объем гидролизата, см3;
S: — интегрируемая величина площади пика аминокислоты стандартного рабочего раствора;
т —масса навески пробы, мг.
Полученный результат корректируют с учетом разведения гидролизата и потери массы навес
ки корма после обезжиривания.
Для пересчета цистеиновой кислоты и метнонинсульфона в цистин и метионин используют
переводные коэффициенты 0.710 и 0,023 соответственно.
За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое результатов двух
параллельных определений. Результаты вычисляют до третьего десятичного знака и округляют до
второго десятичного знака. Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных
определений (А,) при доверительной вероятности Р = 0.95 не должны превышать значений:
для цистеина А* = 0.132 + 0,058 А;
для метионина As —0,06 + 0.088 X,
где А’— среднеарифметическое результатов двух параллельных определений.
Допускается проведение анализа без параллельных определений при наличии в партии испы
туемых проб стандартных образцов (СО). В этом случае за результат испытания принимают резуль-
182