ГОСТ 24230-80 С. 2
насос водоструйный лабораторный:
шкаф сушильный лабораторный;
центрифугу лабораторную с частотой вращения 2500 мин-1;
пипетку автоматическую вместимостью 50 см3;
пробирки центрифужные вместимостью 100 см3;
эксикатор по ГОСТ 25336—82 или аналогичных марок;
штативы для пробирок;
пепсин медицинский;
фермент целлюлазу (целловиридин) марки ГЗх, активностью не менее 75 ед/г;
кислоту соляную по ГОСТ 3118—77, х.ч.;
кислоту лимонную, ос.ч.;
натрий кислый ортофосфорнокислый двузамещенный 12-водный. ос.ч.;
воду дистиллированную по ГОСТ 6709—72.
(Измененная редакция, Изч. № 1).
3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ
3.1. П р и г о т о в л е н и ер е а к т и в о в
3.1.1. Раствор пепсина, 0,2 %-ный: 2 г пепсина растворяют в 1дм30,1 М соляной кислоты.
(Измененная редакция, Изч. № 1).
3.1.2. Раствор лимонной кислоты 0,1 М: 21,008 г лимонной кислоты растворяют в I дм3
дистиллированной воды.
3.1.3. Раствор кислого ортофосфорпокислого натрия 0,2 М: 35,52 г натрия кислого ортофос-
форнокислого растворяют в I дм3дистиллированной воды.
3.1.4. Раствор цитрат-фосфатный буферный с pH 4.6: 10,65 см3 0,1 М раствора лимонной
кислоты смешивают с 9,35 см3 0,2 М раствора натрия кислого ортофосфорпокислого.
3.1.5. Раствор целлюлазы: 5 г целловиридина растворяют в 1дм3 цитрат-фосфатного буфера.
3.1.6. Определение активности це.ыюлазы
Для определения активности целлюлазы готовят стандартный раствор: 5 г целловиридина
растворяют в 100 см3 нитрат-фосфатного буфера, получая таким образом в I см3 раствора 50 мг
фермента. В 10 предварительно высушенных до постоянной массы пробирок помешают по 200 мг
корма известной переваримости, значение которой определено в опытах in vivo (на животных),
приливают в каждую из них соответствующее количество стандартного раствора и цитрат-фосфат-
ного буфера, как указано в таблице.
Номер пробирки
Количество
стандартного раствора.
СИ*
Количество
ш ират-фосфатного
буфера. см ‘
Содержание
(активность),
фермента, мт
Переваримость
корма. %
1
2
1
2
3
4
5
6
3
4
5
6
7
8
7
8
19
18
17
16
15
14
13
12
9
9
И
10
10
10
50
100
150
200
250
300
350
400
450
500
Пробирки закрывают пробками, ставят в биологический термостат и выдерживают там в
течение 24 ч при температуре 38—40 “С. После этого надосадочную жидкость отсасывают водоструй
ным насосом, а пробирки с остатками непереваренного корма высушивают в сушильном шкафу при
температуре 100—105 *С до постоянной массы. Переваримость (растворимость) сухого вещества
корма в каждой пробирке определяют по формуле, приведенной в п. 5.1. На основании полученных
данных о переваримости корма строят калибровочную кривую. Оптимальной считается та доза
фермента, увеличение которой не приводит к дальнейшему (более 5 %) повышению переваримости
(растворимости) сухого вешества корма.
3.1.5. 3.1.6. (Измененная редакция, Изч. № 1).
3.2.П о д г о т о в к а пробы для а н а л и з а
3.2.1.Сразу после поступления в лабораторию, по не более 4 ч после отбора пробы фиксируют
в сушильном шкафу при температуре 80—90 *Св течение 30 мин для прекращения ферментативных
процессов в свежескошенных растениях.