ГОСТ Р 57247—2016
Затем яйца высыпают на фильтровальную бумагу, просушивают в чистом помещении 30 мин и
помешают в чашку Петри на фильтровальную бумагу с вырезанным сектором, в который вкладывают
ватныйтампон, смоченный0,1 %-ным раствором марганцовокислогокалия. Тампон недолжен касаться
бумаги.
5.7.2.8 Чашку Петри помещают в климатическую камеру притемпературе (21
а
1) °С, относитель
ной влажности воздуха 70 %—90 % в равномерном освещении камеры лампами дневного света осве
щенностью не менее 100 лк в течение 18ч в сутхи ивыдерживаютдо начала отрождения гусениц.
5.7.2.3 В период массового отрождения гусениц их рассаживаютв чашки Потри по 150—200 штук,
в которые предварительно наносят питательную среду толщиной 3—5 мм кольцом от 1/3 до 2/3 диа
метрачашки Петри. Гусеницсодержатв климатическийкамерепри режимахпо5.7.2.8без смены корма.
Питательную среду готовятследующим образом:
200 г сухихсемянфасоли замачивают300 см1водя втечениесуток, затем в размельчителетканей
РТ-1 размельчают до образования однородной кашицы. Постоянно помешивая, добавляют последо
вательноследующие компоненты:
- 15 г дрожжей.
- 12 г сахарозы.
- 3 гметабена. растворенных в 10см3этилового спирта,
- 4 гкалия фосфорнокислогодвузамещенного.
- 5 см340 %-ного раствора формалина.
- 9 г стерильной, измельченной вэлектрокофемолкефильтровальной бумаги, на которую вылива
ют расплавленный, охлажденный до температуры 70 °С агар (15 г микробиологического агар, расплав
ленного в 350 см3воды).
Смесь охлаждаютдо температуры 40 °С. вносят4 г аскорбиновой кислоты иперемешивают.
Питательную среду разливают в стерильные банки, закрывают стерильной бумагой и хранят при
температуре 5 °Сне более 14дней.
5.7.2.10 Первых перелинявших на 2-й возраст гусениц, количество которых не более 5 % от отро
дившихся. выбраковывают. Массовый выбор тест-объекта проводят на 2—3 день после начала линьки
вручную.
5.7.3 Проведение испытания
Готовят параллельные водные суспензии контрольного образца в лепидоцида на расчета 1 г
препарата и 99 г воды в пяти концентрациях: 0,25: 0,06; 0.016; 0.004; 0.001 %, обеспечивающих гибель
тест-объекта от (15 ± 56) до (85 ± 5)%.
Исходную 0,25 %-иую суспензию готовят с помощью размельчителя тканей РТ-2 при скорости
3000 об/мин в течение 2 мин, а суспензию других концентраций — путем последовательных четырех
кратных разведений.
Каждую концентрацию лепидоцида испытывают в трех параллельных определениях.
3см3суспензии каждой концентрациитщательно перемешиваютс 15г питательнойсреды в ступке
до получения однородной массы.
Полученную массу раскладывают на внутреннюю поверхность крышки чашки Петри по (5
а
1) г в
каждую. Туда же помещают по 15 гусениц второго возраста. Одновременно ставят контрольный опыт в
трехпараллельныхопределениях:
- 15 гпитательнойсреды перемешиваютс 3 см3воды иполученную массураспределяют в3 чашки
Петри, вкаждую изкоторыхпомещаютпо 15гусениц. ЧашкиПетри с гусеницами помещаютв термостати
выдерживаютпри температуре (21 ± 1) °С. Количество погибшихгусениц подсчитывают на 6-е сутки.
5.7.4 Обработка результатов
Гибель гусениц (Х3) в долях с поправкой на гибель в контрольном опыте вычисляют отдельно для
каждой концентрации липедоцида поформуле Аббота:
ITfT
- р„ -Р,
(
3
)
где Р0 — доля мертвыхособей в опыте (среднее арифметическое трех параллельных определений);
Р, — доля мертвыхособейв контроле(среднееарифметическоетрехпараллельныхопределений);
На основанииполученныхданныхвычисляютЛ К^ поформуле Керберав процентахконцентрации
лепидоцида в суспензии или вмг лепидоцида на 1г корма:
|длки =1дСы- G •(£ Х3- 0,5),
где Си — максимальная из испытанных концентраций;
8