ГОСТ РИСО 13079—2015
Приложение О
(справочное)
Измерение скорости оседания эритроцитов по референтному методу Вестергрена
0.1 Принцип
Референтный метод предназначен для того, чтобы представить методику для верификации надежности
любых модификаций теста. Он выполняется с кровью, содержащей этилендиаминтетрауксусную кислоту, без раз
ведения цитратом или солевым раствором, сиспользованием капиллярных трубок Вестергрена. какописано выше, и
с применением экспериментально полученной формулы для коррекции.
Для теста используютколонкудлиной 200 мм. наполненную кровью с антикоагулянтом, оставляют колонку на
60 мин. без встряхивания, при температуре (20
±
3) ‘С или (27
±
2) ‘С (см. 8.2. перечисление а)) и определяют высо
ту осадка.
0.2 Реагенты
D.2.1 Двухкалиевая этилендиаминтетрауксусная кислота (К
2
ЭДТА). (1.50
±
0,25) мг/мл крови.
D.2.2 Раствор тринатрийцитрата (Na
3
C
6
H
5
0 7). (0,11
±
0.01)моль/л.
Растворить 32.8 г Na
3
C
6
H
5
0
7
х 2HzO в 1л дистиллированной или деионизированной воды.
D.2.3 Изотонический солевой раствор NaCI. 9 гдо 1 л Н
2
0.
Профильтроватьчерезстерильную мембранус максимальнымдиаметром пор 0,22 мкм встерильный контей
нер и хранить при 4 ’С. Перед употреблением визуально оценить отсутствие частиц или плесени.
D.3 Аппарат
D 3.1 Штатив, который должен прочно удерживать капиллярную трубку в вертикальном положении и сохра
нять капиллярную трубку, наполненной кровью до нулевой отметки.
D.4 Условия испытания
Тест не следует выполнять под прямым солнечным светом, возле источника тепла или на сквозняке.
Капиллярная трубка не должна подвергаться вибрации во время испытания.
Испытаниедолжно быть проведено в условиях постоянной температуры (20
1
3)‘С или (27 : 2)*С.
П р и м е ч а н и е — Выполнение теста при температуре вне указанных пределов и при колебаниях темпера
туры во время теста может вызвать значительные расхождения результатов.
В случае если испытание проводится при температуре,отличающейсяот(20
±
3)“С. должен бытьопределен
нормальный уровень скорости оседания эритроцитов.
D.5 Методика
Предупреждение — Весьма существенно, чтобы наполнение пипетки не проводилось ртом, во избе
жание опасности инфицирования, наполнение должно выполняться механически.
Последовательность процедур методики.
a) Выбрать 10образцов крови сантикоагулянтом ЭДТА.если возможно созначениями СОЭ в широкихпреде
лах от 15 мм до 150 мм. Отрегулировать гематокрит в части каждого образца, если необходимо, до примерно
0.32 л/л путем центрифугирования образцов, удаления соответствующего количества плазмы или эритроцитов и
затем ресуспендирования клеток при осторожном смешивании.
b
) Непосредственно перед наполнением капиллярной трубки Вестергрена смешатьобразец путем, по мень
шей мере.восьмикратного полного переворачивания.
Измерить СОЭ в каждом образце (неразведенном) с помощью референтного метода Вестергрена в следую
щем порядке:
1) Начать измерение скорости оседания эритроцитов в пределах 2ч после пункции вены.
2) Наполнить капиллярную трубкуВестергрена с нижнего концадо нулевой отметки кровью, подготовленной
таким образом, как описано в перечислении а), хорошо перемешанной непосредственно перед использованием.
3) Поместить в штатив капиллярную трубку Вестергрена. наполненную раствором крови.
4) Оставить капиллярную трубку Вестергрена в неподвижном положении на (60 £ 1) мин и затем немедленно
прочесть на шкале верхний уровень слоя эритроцитов
Выразить результаты в миллиметрах за первый час.
c) Отрегулировать результат отсчета на отсутствие разведения следующим образом.
Откорректированная СОЭ (мм за 1ч) = (СОЭ в неразведенной крови х0.85) — 12.
11