ГОСТ 33041— 2014
Тестируемое вещество вносят в эту почву и инкубируют в условиях, способствующих быстрому
проявлению микробного метаболизма. В этих условиях источник доступного углерода в почве быстро
расходуется. Углеродное голодание вызывает как гибель части микробных клеток, так стимулирует их
переход в неактивное состояние или в форму спор. Если тест проводится в течение 28 сут. совокупный
отклик метаболических реакций может быть оценен по отношению кнеобработанной почве (контролю),
какрастущее сокращение запасов метаболически активной микробной биомассы [7]. Величина биомас
сы. при лимите углерода в условиях проведенияэксперимента, определяется воздействием химиката и
не может превысить уровень контроля. Следовательно, нарушения, вызванные тестируемым
веществом, всегда отчетливо проявятся к концу эксперимента.
3.4Данный тест разработан, прехще всего, для веществ с предсказуемой дозой внесения, напри
мер, средств защиты растений, для которых способ применения и дозы известны. Для агрохимикатов
достаточно тестирование двух доз. соответствующих ипревышающих рекомендованную норму приме
нения. Агрохимикаты могут тестироваться в виде действующих веществ или препаративных форм.
Однако данный тест не ограничивается агрохимикатами, норма применения которых известна.
Изменяя количество тестируемого вещества, вносимого в почву и способ его применения, тест может
быть проведенс химикатами, для которыхпредполагаемая доза внесения в почву не известна. Так. для
веществ, неотносящихся кагрохимикатам, проводится тестирование трансформации углерода в серии
концентраций. Результаты теста используютдля построения зависимости проявления эффектаотдозы
внесения и рассчитывают величину ЕСХ. где х определяет % воздействия.
4 Принцип теста
Просеянную почву обрабатывают тестируемым веществом, а необработанная почва служит кон
тролем. При исследовании агрохимикатов выбирают какминимум две концентрации, принимая во вни
мание максимальную предполагаемую дозу их полевого применения. Через 0.7,14 и 28 сут инкубации
образцы обработанной и контрольной почв обогащают глюкозой и измеряют в течение 12 ч интенсив
ность дыхания, индуцированного глюкозой. Интенсивность дыхания выражают как эмиссию диоксида
углерода(мгСО^кгсухой почвы вчас) илискорости поглощениякислорода(мг02/кг сухой почвыв час).
Значения интенсивности дыхания в образцах с внесением исследуемого вещества сравнивают с
контролем и рассчитывают отклонение в процентах от контроля. Продолжительность эксперимента не
менее28сут. Если втечение 28сут разницамежду опытными иконтрольнымивариантамидостигаетили
превышает 25 %. исследование продолжают с 14-дневным интервалом максимум до 100 сут.
При тестировании неагрохимикатовдопускается определение интенсивности дыхания, индуциро
ванного глюкозой (по количеству выделившегося диоксида углерода или поглощенного кислорода) в
опытных и контрольных образцахпочвчерез 28 сут инкубации. Результаты эксперимента с различными
концентрациями обрабатывают с использованием регрессионной модели и представляют в виде ЕСХ
(например, ЕСМ, ЕС25 и/или ЕС10).
5 Достоверность теста
Оценка результатов тестирования агрохимикатов основана на относительно небольших отклоне
ниях(среднее значение составляет ± 25 %) интенсивности выделения диоксида углерода или поглоще
ния кислорода в тестируемой и контрольной пробах почвы, поэтому большие различия в результатах
параллельных контрольных проб могут привести кполучению ложных результатов. В связи с этим, раз
личия результатов параллельных контрольных проб должно быть менее И 5 %.
6 Описание теста
6.1 Оборудование
6.1.1 При тестировании используютконтейнеры, изготовленныеизхимически инертного материа
ла. Контейнерыдолжны быть подходящего размера для проведения процедуры инкубации почвы. Инку
бация может проводитьсялибодля одной большой партии почвы, либодлясерии индивидуальных проб
почвы (см. 8.2). При тестировании следует уделять внимание минимизации потери воды иобеспечению
газообмена междупочвой иатмосферой (например, контейнеры могут быть покрыты перфорированной
полиэтиленовой пленкой). При тестировании летучих веществ необходимоиспользовать герметичныеи
газонепроницаемые контейнеры. Контейнерыдолжны быть такогоразмера, чтобы проба почвы занима
ла примерно одну четвертую их объема.
2