ГОСТ 32473—2013
Необходимо проводить исследование как минимум пяти концентраций, составляющих гео
метрическую прогрессию со знаменателем не более 2.2. Подходящий диапазон концентраций подби
рается до начала основного теста на основании теста по определению диапазона концентраций.
6.9 Контрольные группы
В дополнение к серии основных тестов проводят одно тестирование с раствором, не содер
жащим исследуемое вещество, и при необходимости одно контрольное тестирование с солюбилиза
тором (растворителем, эмульгатором или диспергатором).
6.10Наблюдения
Тестовые группы проверяют по крайней мере по прошествии 24-ех, 48-и, 72-ух и 96-и ч.
Особь рыбы признается мертвой, если не наблюдается видимого движения (например, жаберного
движения) и реакции на касание хвостового стебля. Смертность регистрируется, а умершие
рыбы удаляются из тестируемого раствора. Желательно также проводить наблюдения через 3 и 6 ч
после начала теста. Помимо смертности также необходимо регистрировать аномальное поведение
(напри мер. потерю равновесия, изменение способности плавать, изменение дыхательной функции,
появле ние пигментации и пр.). Измерение pH. содержания растворенного кислорода и температуры
прово дят как минимум один раз в день.
6.11 Пороговый тест
С помощью процедур, представленных в настоящем стандарте, может быть проведен порого
вый тест с концентрацией исследуемого вещества 100 мг/л для того, чтобы показать, что 1_С50превы
шает данную концентрацию. Пороговый тест должен проводиться с использованием как минимум 7
рыб и 7 рыб в контрольной пробе. Согласно биномиальной теории в тесте с 10 рыбами с нулевой
смертностью, вероятность того, что LC.» больше 100 мг/л, составляет 99.9%. В тесте с 7. 8 или 9 ры
бами, отсутствие смертности как минимум на 99% подтверждает, что 1_С5Сбольше концентрации, ис
пользуемой в пороговом тесте. Если в пороговом тесте наблюдается смертность, должно быть про
ведено полное тестирование. Любые сублетальные эффекты должны быть зарегистрированы.
7Данные иотчет о проведении теста
7.1Обработка результатов
7.1.1 Совокупный процент смертности для каждого периода воздействия (24. 48. 72 и 96 ч)
изображается на графике зависимости смертности в процентах от логарифма тестируемой концен
трации. Далее для расчета LCso для соответствующего периода воздействия используются стандарт
ные статистические процедуры. Доверительные интервалы (р = 0.95) для расчетных величин LCM
определяются с использованием стандартных статистических процедур.
7.1.2Если для расчета величин LC50полученных данных недостаточно, то самая высокая кон
центрация. не приводящая к гибели рыб. и самая низкая концентрация, приводящая к 100-процентной
смертности, должны использоваться для определения LCso путем аппроксимации (за LCso принимает ся
среднее геометрическое данных концентраций).
7.2 Отчет о проведении теста
В отчет о проведении теста включается следующая информация об:
исследуемом веществе:
- агрегатное состояние и физико-химические свойства;
- данные о химической идентификации:
тестируемом виде рыб:
- научное наименование, штамм, размеры, поставщик, любая предварительная подготовка;
условиях проведения теста:
- характеристика процедуры тестирования (статический, полустатический или проточный тест,
аэрация, загрузка);
- характеристика качества воды (pH. жесткость, температура);
- концентрация растворенного кислорода. pH и температура тестового раствора через 24-
часовые интервалы (в полустатической системе pH необходимо измерять до и после обновления во
ды);
- метод приготовления основных и тестируемых растворов;
- исследуемые концентрации;
- концентрации исследуемого вещества в тестируемом растворе;
- количество особей рыб в каждом тестируемом растворе.
Результаты теста:
- максимальная концентрация, не вызывающая смертность в период теста;
- минимальная концентрация, приводящая к 100-процентной смертности в течение всего пе
риода теста;
- совокупная смертность при каждой концентрации в рекомендуемый период наблюдения:
4